Memilih alat kultur yang betul adalah penting untuk memastikan pertumbuhan sel yang optimum dan hasil percubaan. Apabila memilih bekas kultur sel, adalah penting untuk mempertimbangkan faktor seperti jenis sel, tujuan khusus kultur anda, skala kultur, jenis medium kultur, bahan dan saiz bekas, rawatan permukaan, penutup untuk pertukaran gas, dan keserasiannya dengan peralatan makmal anda.
Berikut ialah faktor utama yang perlu dipertimbangkan semasa memilih kapal kultur sel yang betul
1. Pilih wadah kultur sel berdasarkan jenis sel
Sel Perekat
Sel-sel ini memerlukan permukaan untuk melekat dan merebak. Untuk sel yang melekat, anda memerlukan kapal dengan luas permukaan yang menyediakan ruang yang cukup untuk pelekatan dan pertumbuhan sel.
Contoh Kelalang yang dirawat kultur tisu, piring petri dan pinggan berbilang perigi.
Sel Suspensi
Sel-sel ini tumbuh terapung dalam medium, jadi permukaan tidak dipertimbangkan.
2. Pilih bekas kultur sel berdasarkan saiz (Kapasiti Isipadu)
Budaya Berskala Kecil
Untuk eksperimen berskala kecil atau penyaringan berkemampuan tinggi, kapal yang lebih kecil adalah sesuai.
Contoh Plat berbilang perigi (plat kultur 6, 24, 96 sel),
Piring petri, atau kelalang T25.
Budaya Berskala Besar
Jika anda perlu mengembangkan kuantiti sel yang banyak, salur atau bioreaktor yang lebih besar adalah lebih baik.
Contoh kelalang kultur sel T75 dan T175, bioreaktor atau kelalang pemintal untuk kultur sel ampaian.
3. Pilih bekas kultur sel berdasarkan rawatan permukaan
Permukaan yang Dirawat Kultur Tisu
Kapal telah dirawat terlebih dahulu untuk menggalakkan perlekatan sel, menjadikannya sesuai untuk jenis sel yang melekat. Ini biasanya disalut dengan bahan seperti kolagen, fibronektin atau komponen matriks ekstraselular yang lain.
Permukaan Tidak Dirawat
Sesuai untuk kultur ampaian atau apabila sel tidak perlu melekat pada permukaan. Ia biasanya digunakan untuk sel yang tumbuh dengan bebas dalam medium.
4. Pilih bekas kultur sel berdasarkan bahan
Polistirena yang biasa digunakan untuk aplikasi kultur sel standard. Ia jelas, membolehkan pemeriksaan visual yang mudah, dan berfungsi dengan baik untuk kedua-dua sel pelekat dan penggantungan.
Polikarbonat atau Polipropilena digunakan untuk aplikasi bioreaktor tertentu dan untuk vesel yang memerlukan lebih fleksibiliti atau rawatan permukaan tertentu.
Kaca yang digunakan untuk kultur tisu standard kerana kos dan kebolehpecahan, bekas kaca mungkin sesuai untuk aplikasi tertentu atau kultur berskala besar.
Kelalang
Untuk kultur sel am, T-flasks (T25, T75, T150) biasanya digunakan. Permukaan rata menyediakan kawasan yang baik untuk lampiran dan pertumbuhan sel. Ia boleh digunakan untuk kedua-dua sel yang melekat dan kultur penggantungan jika keadaan yang sesuai dikekalkan.
Pinggan Petri
Biasa untuk kultur berskala kecil dan untuk eksperimen yang memerlukan pemerhatian, seperti ujian pembentukan koloni.
Pinggan Telaga Berbilang
Ini berguna untuk saringan pemprosesan tinggi dan eksperimen berskala lebih kecil. Pinggan dengan 6, 12, 24, 48,
96, atau 384 telaga tersedia, dan sesuai untuk ujian berasaskan sel, pembebasan sitokin, ujian dadah dan aplikasi pemprosesan tinggi yang lain.
Kelalang Pemintal
Digunakan untuk kultur sel penggantungan, terutamanya dalam volum yang lebih besar di mana pengadukan terkawal diperlukan untuk mengekalkan pertumbuhan sel dan untuk mengelakkan penggumpalan sel.
Bioreaktor
Untuk kultur ampaian berskala besar, bioreaktor membenarkan kawalan yang lebih kompleks ke atas keadaan persekitaran (cth., pH, suhu, pengoksigenan) dan digunakan untuk pengeluaran volum besar, seperti dalam pembuatan biofarmaseutikal.
6. Pilih bekas kultur sel berdasarkan kemandulan dan pengudaraan
Kemandulan
Pastikan bekas itu steril atau telah disterilkan untuk mengelakkan pencemaran. Kebanyakan bekas kultur komersial telah disterilkan terlebih dahulu, tetapi sentiasa periksa bungkusannya.
Pengudaraan
Sesetengah vesel, seperti kelalang, datang dengan penutup atau penapis berventilasi untuk membolehkan pertukaran udara sambil mengelakkan pencemaran. Ini penting apabila mengkultur sel dalam keadaan berketumpatan tinggi.
7. Pilih bekas kultur sel berdasarkan kemudahan penggunaan
Boleh autoklaf lwn. Boleh guna
Sesetengah bekas kultur boleh diautoklaf untuk digunakan semula (cth., botol kaca, kelalang plastik tertentu), manakala yang lain adalah sekali guna dan boleh guna (cth., piring petri plastik, pinggan berbilang perigi).
Pengendalian dan Pengangkutan
Pertimbangkan kemudahan pemindahan sel antara kapal. Sebagai contoh, plat berbilang perigi mungkin memerlukan plat khusus untuk pengendalian mudah dengan peralatan seperti pipettor automatik.
8. Pilih bekas kultur sel berdasarkan isipadu sederhana kultur
Pilih kapal yang boleh menampung isipadu medium kultur yang dikehendaki tanpa membazirkan sumber. Jika bekerja dengan kultur volum tinggi, kelalang atau bioreaktor yang lebih besar mungkin diperlukan, manakala volum yang lebih kecil sesuai untuk hidangan atau pinggan kultur sel.
9. Pilih wadah kultur sel berdasarkan pertimbangan kos
Boleh guna vs. Boleh guna semula
Bekas plastik pakai buang adalah kos efektif dan mengurangkan risiko pencemaran, tetapi ia boleh mahal untuk operasi berskala besar. Bekas kaca boleh guna semula mempunyai kos pendahuluan yang lebih tinggi tetapi boleh disterilkan dan digunakan semula beberapa kali, menjadikannya lebih menjimatkan untuk kegunaan jangka panjang.
Kecekapan Isipadu
Pastikan saiz vesel adalah sesuai untuk mengelakkan pembaziran bahan, terutamanya apabila menggunakan media pertumbuhan atau reagen yang mahal.
10. Pilih bekas kultur sel berdasarkan keperluan aplikasi tertentu
Pengimejan
Jika anda perlu memvisualisasikan sel di bawah mikroskop, pilih bekas dengan bahan optik yang jelas dan dimensi yang sesuai untuk persediaan pengimejan anda (cth., plat berbilang perigi untuk penapisan kandungan tinggi atau hidangan bawah kaca untuk pengimejan sel hidup).
Pergolakan Terkawal
Untuk kultur sel ampaian, pertimbangkan kelalang pemutar atau bioreaktor yang menyediakan pengadukan terkawal untuk memastikan sel terampai sekata.
Kesimpulan
Memilih wadah kultur sel yang betul memerlukan pengimbangan beberapa faktor, termasuk jenis sel, skala kultur, keserasian bahan dan keperluan eksperimen khusus. Sel yang melekat akan memerlukan permukaan yang menggalakkan perlekatan, manakala sel penggantungan mendapat manfaat daripada volum dan pergolakan yang lebih besar. Untuk kerja berskala kecil, plat berbilang perigi atau kelalang T mungkin mencukupi, manakala kultur yang lebih besar mungkin memerlukan kelalang pemutar atau bioreaktor. Sentiasa pastikan bahawa vesel memenuhi keperluan kemandulan dan pengendalian anda, dan pertimbangkan keberkesanan kos berdasarkan penggunaan anda.
Dengan mempertimbangkan faktor ini, anda boleh memilih kapal optimum yang menyediakan keadaan yang sesuai untuk kultur sel dan matlamat percubaan anda.