Pengenalan asas
Erythrocyte lysate adalah salah satu kaedah yang paling mudah dan mudah untuk membuang sel darah merah, iaitu, membelah sel darah merah dengan lysate, yang tidak merosakkan sel bernukleus dan boleh membuang sel darah merah sepenuhnya. Pembelahan lysate adalah kaedah penyingkiran sel darah merah ringan, yang digunakan terutamanya untuk pemisahan dan penulenan sel tisu yang disebarkan oleh pencernaan enzim, pemisahan dan penulenan limfosit, dan penyingkiran sel darah merah dalam eksperimen protein tisu dan nukleik. pengekstrakan asid. Sel-sel tisu yang diperolehi oleh lisat sel darah merah tidak mengandungi sel darah merah, dan boleh digunakan selanjutnya untuk kultur primer, gabungan sel, sitometri aliran, pemisahan dan pengekstrakan asid nukleik dan protein, dsb.
Arahan penggunaan
Sampel sel tisu
1. Tisu-tisu segar telah dihadamkan oleh pankreas/enzim atau kolagenase dan disebarkan ke dalam penggantungan sel tunggal, dan supernatan dibuang melalui sentrifugasi.
2. Ambil ELS lysate dari peti sejuk pada 4â, tambah ELS lysate kepada cell precipitate dalam nisbah 1:3-5 (tambah 3-5ml lysate kepada 1ml cell compacted), tiup perlahan-lahan dan gaul.
3. Empar pada 800-1000rpm selama 5-8 minit dan buang cecair jernih merah atas.
4. Bahagian yang dimendakkan dikumpulkan dan disentrifugasi dengan larutan Hank atau larutan kultur bebas serum selama 2-3 kali.
5, jika keretakan tidak lengkap/lengkap boleh diulang langkah 2 dan 3.
6. Sel penggantungan semula untuk eksperimen seterusnya; Jika RNA diekstrak, sebaiknya lakukannya dalam larutan yang disediakan dari Langkah 4 menggunakan air DEPC
Sel darah merah mempunyai kitaran hayat yang sangat singkat, hanya 120 hari, tetapi ia membiak darah dengan sangat cepat, dan dalam kes ini ia sangat mampu membahagikan sel, dan ia adalah sel yang paling cepat membahagikan semua, jadi sel ini sangat berharga, jadi ia sangat berguna untuk kultur sel. Ia sangat mudah, ia tidak mempunyai sebarang organel di dalamnya, hanya membran sel dan protein.